세포 배양 실험에서 피펫은 매우 자주 사용되며, 작동의 정확도는 실험 결과의 신뢰성과 반복성에 직접적인 영향을 미칩니다. 다음은 세포 배양에서 피펫 작동을위한 몇 가지 팁으로, 실험에 도움이되기를 바랍니다.
1. 오른쪽 피펫과 팁을 선택하십시오
- 피펫 선택 : 전달할 액체의 부피에 따라 오른쪽 피펫을 선택하십시오. 대부분의 피펫의 일반 작동 볼륨 범위는 표시된 범위의 10-100%입니다. 피펫의 부피를 최대 부피의 10% 미만으로 설정하지 말고 소규모 피펫 피펫 작업에는 소규모 피펫을 사용하십시오.
- 팁 선택 : 피펫과 일치하는 팁을 선택하고 공기 누출을 피하기 위해 팁이 단단히 삽입되어 있는지 확인하십시오. 또한, 특정 실험 (예 : 무균 조작)의 경우 자동 클레이브 팁을 선택해야합니다.
2. 팁을 헹구십시오
팁 2-3 시간을 헹구어 팁에 균질 필름을 형성하여 피펫 팅의 정확도를 향상시킵니다. 또한, 마이크로 피펫의 모세관 효과를 중화시킬 수있어 팁 내부의 온도가 대량 피펫 팅의 샘플 온도와 일치 할 수 있습니다. 헹굼은 핫 및 콜드 솔루션을 피펫 팅 할 때 결과에 악영향을 미칠 수 있습니다.
3. 흡인과 분배 속도를 제어하십시오
- 부드러운 누르기 : 컨트롤 버튼을 갑자기 누르고 방출하지 않고 제어 버튼을 부드럽고 지속적으로 눌러 놓습니다. 이것은 거품의 형성을 피하고 피펫 팅의 정확도를 향상시킬 수 있습니다.
- 일시 중지 : 액체를 흡인 한 후에는 액체에 약 1 초 동안, 특히 점성 액체의 경우 팁을 약 1 초 동안 그대로 두십시오. 팁을 즉시 꺼내면 불완전한 액체 흡인이 발생할 수 있습니다.
4. 팁의 침수 깊이에주의를 기울이십시오.
-Micropipette : 팁은 2-3 mm을 침수해야합니다.
- 대규모 피펫 : 침지 깊이는 5-6 mm이어야합니다. 팁이 너무 깊어지면 팁 내부의 공기가 압축되어 너무 많은 액체가 흡인됩니다. 팁 표면에 남아있는 액체도 결과에 영향을 줄 수 있습니다.
5. 수직 작동
수직 위치에서 20도 이상으로 탈퇴하지 않고 샘플의 피펫을 가능한 한 수직으로 침지시킵니다. 피펫 부피의 정확도를 향상시키는 것 외에도 과도한 틸팅으로 인해 액체가 피펫으로 유입되는 것을 방지 할 수 있습니다.
6. 피펫 팁을 관찰하십시오
액체를 배출 할 준비를 할 때 피펫 팁의 표면에 부착 된 과도한 액 적이 있는지 여부에주의하십시오. 액체를 배출 한 후, 피펫 팁의 끝을 컨테이너 측면에 닿아 배출이 피펫 팁 끝에 마지막 액체 방울이 남아 있지 않도록 충분히 철저 할 수 있습니다.
7. 적절한 피펫 팅 방법을 선택하십시오
- 양성 흡입 방법 : 대부분의 액체에 적합합니다. 액체를 빨아 들일 때 버튼을 첫 번째 스톱 포인트로 누른 다음 버튼을 천천히 해제하여 시작점으로 돌아갑니다. 그런 다음 버튼을 첫 번째 스톱 포인트로 누르면 액체를 배출하고 잠시 일시 중지 한 다음 버튼을 두 번째 정지 지점으로 계속 눌러 나머지 액체를 날려 버립니다. 마지막으로 버튼을 해제합니다.
- 후진 흡입 방법 : 고독한 액체, 생물학적 활성 액체, 쉽게 거품이되는 액체 또는 매우 적은 양의 액체에 적합합니다. 먼저 세트 범위보다 더 많은 액체를 빨고 액체를 옮길 때 나머지 액체를 날려 버리지 마십시오.
8. 피펫을 깨끗하게 유지하고 유지 관리하십시오
- 정규 교정 : 피펫을 일정 시간 동안 사용한 후에는 정확성을 보장하기 위해 교정해야합니다.
- 청소 :마다 사용 후 피펫을 제 시간에 청소하여 잔류 액체가 다음 실험을 오염시키는 것을 피해야합니다.
9. 무균 작동
세포 배양에서 무균 조작은 매우 중요합니다. 피펫을 사용할 때 다음과 같은 점에주의하십시오.
- 소독 : 사용하기 전에 피펫과 팁을 알코올 면봉으로 닦아서 소독을 위해 닦아냅니다.
- 교차 오염을 피하십시오 : 교차 오염을 피하려면 각 샘플에 새 팁을 사용하십시오.
위의 팁을 사용하면 세포 배양 실험을 위해 피펫을 사용하여보다 정확하고 효율적으로 사용하고 실험 결과의 신뢰성과 반복성을 향상시킬 수 있습니다. 이 팁이 도움이되기를 바랍니다!