화학, 생물학 및 의학에서 피펫은 미리 정해진 양의 액체를 공급하는 데 사용되는 전형적인 실험실 기구로, 종종 미디어 분배기로 사용됩니다. 피펫팅 결과의 성공은 섬세한 연구를 수행할 때 피펫 볼륨을 얼마나 정확하게 읽는지에 따라 달라집니다. 정확하고 고품질의 계측기를 사용하는 것이 피펫 볼륨을 올바르게 읽는 가장 좋은 방법입니다. 정확성과 정밀도에 대한 실험실 요구 사항이 계속 증가함에 따라 이상적인 피펫팅 기술을 이해하고 완성하는 것이 중요합니다.
피펫은 과학 연구에 사용되며, 소량의 액체를 정확하게 측정하고 옮기려면 높은 정밀도가 필요합니다.
그러나 장비 오작동이나 작업자 오류가 피펫 측정 오류의 원인이 될 수 있습니다. 분주된 부피의 변화는 qPCR과 같은 실험의 결과와 재현성에 영향을 미칠 수 있습니다.
피펫 정확도에 영향을 미치는 요소:
온도
정확한 피펫팅은 온도에 크게 영향을 받습니다. 전달 장치와 액체 사이의 온도 차이가 가장 큰 영향을 미치는 요소입니다. 열 팽창의 케이스별 효과는 액체 표면과 피스톤 사이의 공기 간격(공기 부족 볼륨)에서 발생합니다. 다른 결과들 중에서도, 이는 팁으로 끌어들여지는 액체의 양을 줄이거나 늘릴 수 있습니다.
밀도
팁으로 끌어들여지는 액체의 양은 밀도(질량/부피 비율)의 영향을 받습니다. 물을 사용하는 유사한 절차보다 밀도가 낮은 액체가 흡입됩니다. 밀도가 낮은 액체의 경우 결과는 반대입니다. 이는 유연한 데드 에어 볼륨과 지구 중력으로 인해 발생합니다. 액체 밀도는 온도에 따라 변합니다. 일반적으로 액체의 밀도도 온도에 따라 변합니다. 20도/68도 F에서 물은 일반적으로 0.998kg/dm3의 밀도를 가지고, 에탄올은 0.79kg/dm3의 밀도를 가지고, 황산(95-98% h2SO4)은 1.84kg/dm3의 밀도를 가지고 있습니다.
높은
정확도는 기압과 지리적 고도에 영향을 받습니다. 고도가 높을수록 기압이 낮아지고 변환 계수가 낮아집니다.
또한 일부 액체의 비등점은 실온에 가깝게 크게 떨어져 증발 손실이 크게 증가합니다.
시약 증발
휘발성이 높은 시약은 증기를 흡수하여 팁으로 들어가 내부 압력을 높입니다. 따라서 압력이 증가하여 액체가 짜내질 때 오류가 발생합니다.
잘못된 피펫팅 모드가 선택되었습니다.
피펫팅하는 동안 작업자는 종종 역방향 또는 정방향 모드를 사용할지 여부에 대해 무작위 또는 주관적인 결정을 내립니다. 그러나 점성 샘플은 역방향 모드를 사용해야 합니다. 역방향 모드에서 플런저는 샘플을 흡입하기 위해 완전히 눌러진 다음(첫 번째 정지 지점을 지나서) 샘플을 전달하기 위해 부분적으로만 눌러집니다(첫 번째 정지 지점까지). 따라서 점성 유체에 정방향 모드를 사용하면 전달이 부족하고 수용액에 역방향 모드를 사용하면 전달이 과다합니다.
틸트 피펫팅
샘플 손실은 피펫 팁이 흡인 중에 용기 벽에 닿을 때 발생합니다. 또한, 소량을 피펫팅할 때 피펫을 비스듬히 빼면 표면 장력 효과로 인해 부피가 변할 수 있습니다. 용기에서 피펫을 직접 빼면 오류가 줄어듭니다.